STRC 基因太大，无法装入单个 AAV。其编码序列为 5,325 个碱基对，而 AAV 的包装上限为 4,700 bp。这正是 Iranfar 等（2026）采用双载体策略的原因：将基因分为两段，分别包装于两个独立的 AAV 颗粒中，同时注射，期望它们在同一细胞内发生重组。
"期望"是关键词。双载体策略要发挥作用，两种病毒必须进入同一细胞，两段片段还必须相互找到并重组。每一步都有其对应的概率，损耗会不断叠加。
我们的 mini-STRC（残基 700-1775，3,228 bp）可装入单个 AAV。一个颗粒，一次转导事件，无需重组。这不是渐进式改进，数学模型表明这是一个本质上不同的方案。
病毒颗粒的摄取遵循伽马-泊松（负二项式）分布。与简单泊松分布不同，该模型考虑了病毒递送中极端的细胞间异质性：注射位点附近的细胞所接受的病毒量比远端细胞高出数个数量级。离散参数k捕捉这种过度分散性。
对于双载体：AAV-A和AAV-B必须进入同一个细胞。每种载体获得总剂量的一半。异质性在小鼠中对双载体有利（充分转导的细胞同时获得两种载体），但随着较大人类耳蜗中总体感染复数（MOI）下降，这种优势减弱。共入细胞概率由gamma-泊松联合分布解析计算得出。
即使两段载体共同进入细胞，两个片段也必须在细胞内发生重组。我们以R = 50%重组效率（优化反式剪接设计已发表数据30-100%的中间值）展示结果。效率越低，差距越大。
来自Omichi等（2020）的两个实验数据点：单AAV2实现了83.9%的OHC转导率，双AAV2在小鼠中实现了65.6%的功能性共转导（病毒颗粒浓度3.75×1012 GC/mL）。简单泊松模型预测双载体共转导率仅为35.9%（结果有误）。同时拟合两个数据点得到gamma-泊松分布，λ=8.1，k=0.73，证实了极端的递送异质性（方差为均值的11倍）。
Omichi等（2020）。双AAV耳蜗基因治疗。PMC7270144
在标准临床滴度（3.75×1012 GC/mL）下，单载体 mini-STRC 将功能蛋白递送至的毛细胞数量是双载体全长 STRC 的2.8 倍（R = 50% 重组效率）。当 R = 30% 时，差距扩大至 4.7 倍。这一优势随规模增大而增长：在较小的小鼠耳蜗中仅为 1.3 倍，但人类耳蜗的几何结构会将其放大。
在临床实际滴度下，单载体与双载体之间的差距会扩大。只有在极高滴度（>1013 GC/mL，制造难度极大）下，双载体的效率才接近单载体。
| 病毒滴度 | 单载体 | 双载体 | 差距 |
|---|---|---|---|
| 10¹⁰ | 1.3% | 0% | +1.3% |
| 3×10¹⁰ | 3.8% | 0% | +3.8% |
| 10¹¹ | 11.5% | 0.4% | +11.1% |
| 3×10¹¹ | 27.2% | 2.5% | +24.7% |
| 10¹² | 53.1% | 11.1% | +42% |
| 3.75×10¹² ← clinical | 77.8% | 27.3% | +50.5% |
| 10¹³ | 88.5% | 37.3% | +51.2% |
| 3×10¹³ | 94.7% | 44% | +50.7% |
Our model shows 2.8x advantage for single-vector. The math is clear. But here's the context we can't ignore:
Five dual-AAV clinical trials for OTOF deafness reported positive results in 2024-2025. Regeneron's CHORD trial (NEJM, Oct 2025): 11 of 12 children improved, 3 achieved normal hearing. Lilly's AK-OTOF: hearing restored in an 11-year-old who had been deaf for a decade.
OTOF targets IHCs (inner hair cells), not OHCs. Different cell type, different transduction efficiency. But the delivery platform, the surgical approach, the dual-AAV splitting strategy: all proven safe and effective in human cochlea. Mini-STRC is theoretically better. Dual-AAV is clinically proven. Both matter.